本试剂盒专为科学研究设计，不应用于医学诊断。

人表皮生长因子（EGF）Elisa试剂盒使用说明书

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。实验过程中，首先将预先包被了adropin（AD）抗体的微孔板进行样品和标准品的加样。随后加入HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤，最后使用底物TMB进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，随后在酸性环境下转变为黄色，颜色的深浅与样品中的adropin（AD）浓度呈正相关。通过在酶标仪上于450nm波长下测定样品的吸光度（OD值），可以计算样品的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作中需避免任何细胞刺激。收集血液后，进行3000转的离心10分钟，快速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理，3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟，以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水进行捣碎，3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：若样本在采集后未及时检测，请将样本按一次用量分装，并储存在-20℃以避免反复冻融。样本在室温下解冻时应确保均匀充分。

操作注意事项

本试剂盒包含的标准品（S0-S5）浓度依次为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需要以蒸馏水按1:20进行稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法与操作步骤

通过绘制标准曲线，可以在Excel表格中以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

试剂盒性能免责声明

本试剂盒的使用必须遵循相关实验室规定，任何不当使用均可能影响实验结果。

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